Question
Purificacin de una enzima Un bioqumico descubre y purifica una nueva enzima, generando la siguiente tabla de purificacin. Procedimiento Protenas totales (mg) Actividad (unidades) 1.
Purificacin de una enzima Un bioqumico descubre y purifica una nueva enzima, generando la siguiente tabla de purificacin.
Procedimiento | Protenas totales (mg) | Actividad (unidades) |
---|---|---|
1. Extracto crudo | 20,000 | 4,000,000 |
2. Precipitacin (sal) | 5,000 | 3,000,000 |
3. Precipitacin (pH) | 4,000 | 1,000,000 |
4. Cromatografa de intercambio inico | 200 | 800.000 |
5. Cromatografa de afinidad | 50 | 750.000 |
6. Cromatografa de exclusin por tamao | 45 | 675,000 |
(a) A partir de la informacin proporcionada en la tabla, calcule la actividad especfica de la enzima despus de cada procedimiento de purificacin.
(b) Cul de los procedimientos de purificacin utilizados para esta enzima es ms eficaz (es decir, proporciona el mayor aumento relativo de pureza)?
(c) Cul de los procedimientos de purificacin es menos eficaz?
(d) Hay alguna indicacin basada en los resultados que se muestran en la tabla de que la enzima despus del paso 6 ahora es pura? Qu ms se podra hacer para estimar la pureza de la preparacin enzimtica?
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